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淺析肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒的使用流程

更新時間:2025-01-10點擊次數(shù):349
  肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒是一種用于檢測人血清或血漿中肌聯(lián)蛋白抗體(TitinAb)的實驗工具。該試劑盒在臨床上具有重要的應用價值,尤其在重癥肌無力(Myasthenia Gravis,MG)和胸腺瘤等疾病的診斷中,主要用于體外定量檢測血清、血漿、組織勻漿及相關液體樣本中的肌聯(lián)蛋白抗體含量,試劑盒應保存在2-8℃的環(huán)境中,有效期為6個月。
 
  肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒通常采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(ELISA)。這種方法通過預先包被豚鼠肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)捕獲抗體的微孔板,依次加入標本、標準品和HRP標記的檢測抗體,經(jīng)過溫育并洗滌后,用底物TMB顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成黃色。顏色的深淺與樣品中的肌聯(lián)蛋白抗體濃度呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),即可計算出樣品濃度。
 
  在使用肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒時,需按照以下步驟進行:
 
  1.加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl。注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。
 
  2.溫育:用封板膜封板后,37℃反應120分鐘。
 
  3.洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干。每孔加生物素標記抗體工作液100μl,37℃溫育60分鐘。再次洗滌后,每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液100μl,37℃溫育60分鐘。洗滌5次。
 
  4.顯色:依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色30分鐘。
 
  5.終止:依序每孔加終止溶液50μl,終止反應。
 
  6.測定:用酶標儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
肌聯(lián)蛋白抗體檢測試劑盒

TEL:22-83726755